Анализ крови на ифа вич что это такое


Анализ на ВИЧ методом ИФА: точность, достоверность

Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, – серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. Анализ ИФА на ВИЧ – наиболее доступный метод исследования, но не во всех случаях он информативен.

Что такое ИФА

ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале. С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП. Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.

Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.

Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.

ИФА – метод диагностики ВИЧ

ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.

Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.

Преимущества метода:

  • сравнительно небольшая стоимость;
  • высокая стабильность реагентов;
  • высокая чувствительность;
  • короткий срок проведения;
  • минимальное влияние человеческого фактора.

Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.

Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна». Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.

Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:

  • через 6 недель после вероятного контакта,
  • через 3 месяца,
  • спустя полгода.

ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3. Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.

Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!

Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения. Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.

Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.

Расшифровка результатов ИФА

Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.

Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.

Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:

  • хронические заболевания;
  • длительные инфекционные заболевания;
  • беременность.

Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.

Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.

Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.

Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.

Что делать при положительном ИФА

Отрицательный иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса проведения ИФА недостаточно.

Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблоттинг. Когда в ходе исследований выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и назначит терапию.

Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения, тест ИФА периодически повторяют.

Иногда иммуноблоттинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода после инфицирования при проведении ИФА получится достоверный результат.

Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Чтобы исключить вероятность ошибки, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.

aids24.ru

ИФА-диагностика: в чем суть, определение антител, как проводят и при каких болезнях эффективна?

Содержание:

ИФА (иммуноферментный анализ, ELISA – англ.) вошел в жизнь практической медицины еще где-то в 60-х прошлого столетия. Первоначальной его задачей были гистологические исследования в научных целях, которые сводились к поиску и идентификации антигенной структуры клеток живого организма.

В основе метода ИФА лежит взаимодействие специфических антител (АТ)  и родственных антигенов (АГ) с образованием комплекса «антиген – антитело», который выявляют при помощи фермента. Этот факт натолкнул ученых на мысль, что метод может быть использован в диагностических целях для выявления специфических иммуноглобулинов различных классов, участвующих в иммунном ответе на ту или иную инфекцию. И это был прорыв в клинической лабораторной диагностике!

Активно использоваться метод начал только в начале 80-х и то, в основном, в специализированных учреждениях. Первыми иммуноферментными анализаторами были снабжены центры и станции переливания крови, инфекционные и венерологические стационары, поскольку рожденный на африканском континенте, появившийся на горизонте у нас и тут же примкнувший к «старым» инфекциям грозный СПИД, требовал незамедлительных мер диагностики и поиска лечебных препаратов, воздействующих на него.

Область применения метода ИФА

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных  новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

  • Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
  • Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, гепатиты В и С, хламидиоз, сифилис, уреа- и микоплазмоз, герпетическая и TORCH-инфекции, а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
  • Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших  инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию  формирования  иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

В чем суть ИФА?

Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что  ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих  спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд.  На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

Видео: современное проведение иммуноферментного анализа

Результаты ИФА на примере сифилиса

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм сифилиса, а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

  • IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
  • IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
  • IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

Самый волнительный из иммуноферментных анализов – ИФА на ВИЧ

Анализ на ВИЧ, пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.

ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций, предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

Что можно ожидать от результатов на ВИЧ?

ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

  1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
  2. Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
  3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
  4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

ИФА находит хламидию, цитомегаловирус и даже паразитов

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

  • IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
  • IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
  • IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы  титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ  возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты). Они бывают внушительных размеров (гельминты, а попросту – глисты) или маленькие (амебы, трихомонады, лямблии).

До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился. Для этого нужно лишь взять кровь из вены и найти антитела, которыми организм уже ответил на чужеродные антигены.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

Видео: учебный фильм МГМУ им. Сеченова об основах ИФА

izppp.ru

ИФА анализ крови на ВИЧ

ВИЧ – бич нашего поколения. Какие существуют методы для диагностики ВИЧ, углубленная информация о ИФА-тесте на ВИЧ. Как сдавать, как трактовать результаты анализа.

ВИЧ. Причины и последствия

 Вирус иммунодефицита человека – одна из самых страшных инфекций для нашего поколения.

ВИЧ деструктивно влияет на нашу иммунную систему, и если вовремя не остановить прогресс заболевания, он может трансформироваться в синдром приобретенного иммунодефицита. ВИЧ распространяется через непосредственный контакт партнеров при сексуальном акте через мужские и женские половые органы. Еще одной причиной заражения может стать попадание вируса через кровь. Это происходит вследствие использования нестерильных инструментов, переливанием зараженной крови и даже через поколения: ребенку от инфицированной матери при кормление грудью.

До сих пор ученые по всему миру ломают голову над созданием лекарства нового поколения, способного излечить от СПИДа, однако, несмотря на большие темпы научного прогресса, вирус иммунодефицита человека продолжает распространяться по планете.

ИФА – метод диагностики ВИЧ

Учеными поколения 20-го века разработано несколько методов диагностики ВИЧ, важнейшим из которых считают иммуноферментный анализ. ИФА на ВИЧ стали проводить относительно недавно – в начале девяностых годов. С течением времени метод оттачивался, приобретал новые детали. Теперь достоверность метода ИФА одна из самых высоких – около 98%. Соответственно, такой метод проводится все чаще.

ИФА – первый анализ, с которым сталкивается пациент при обследовании на ВИЧ. Метод ИФА определяет наличие в крови антител. Если тест находит присутствие антител в крови, значит, и вирус присутствует. Однако, информацию по этому тесту необходимо подкреплять и другими анализами, такими как иммунный блоттинг (ИБ) и метод последнего поколения – полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Антитела – специальные белковые соединения, которые продуцируют плазматические клетки после как реакцию на попадание в организм инфекции (антитела начинают образовываться через 1-2 месяца с момента заражения).

Причины возникновения ВИЧ

Врач выпишет вам направление на анализ, если вы контактировали с человеком, зараженным ВИЧ либо существует опасность инфицирования. К группе опасности заражения ВИЧ относят поколения людей:

  • проходящих в течение месяца курс инъекционного лечения;
  • имеющих сексуальные отношения без специальных средств предохранения;
  • переносчиков инфекций, передающихся во время сексуального контакта;
  • пациентам после прохождения процедуры переливания крови либо укола обнаружения причины свертывания крови в восьмидесятые годы.

Если у вас есть сомнения относительно вашего ВИЧ-статуса и опасения, связанные с возможностью заражения, рекомендуется незамедлительно обратиться за помощью в любое медицинское учреждение нашей страны для проведения комплексного обследования на ВИЧ. Результат на анализы получают в течение месяца. Людям в группе риска по ВИЧ рекомендуется проходить обследование через каждые 4 месяца.

Как сдать анализ

Какой-то особенной подготовки к сдаче анализа крови на ВИЧ не требуется, однако лучше придерживаться простейших правил:

  • лучше не кушать с вечера, а сдавать анализ натощак утром;
  • не советуют загружать организм физической работой;
  • употреблять здоровую пищу, воздержаться на некоторое время от сигарет и алкоголя;
  • для исключения ложных показателей теста не стоит сдавать анализ после лечения серьезных заболеваний.

Сама процедура сдачи анализа осуществляется довольно быстро, а вот исследование образца и определение показателей проходит от нескольких дней до половины месяца. В случае, если у вас есть боязнь уколов или вы склонны к головокружениям от вида крови, стоит заблаговременно известить об этом медперсонал.

Суть проведения анализа

Обычно перед сдачей анализа медицинский работник просит заполнить анкету, в которой вы подписываете пункт о согласии на проведение процедуры. Специалист предлагает брошюры для ознакомления, объясняет основные принципы проведения теста:

  • Кожный покров локтевого сустава пациента обрабатывается обеззараживающей жидкостью;
  • Пережимают локтевую вену специальной повязкой, ограничивая отток крови;
  • С помощью шприца производят забор материала из вены пациента, обычно 5 мл;
  • Использованный шприц выбрасывают, пациенту обрабатывают место инъекции и просят согнуть руку в локте, чтобы уменьшить кровотечение;

Вы, возможно, будете ощущать некоторый дискомфорт при проведении анализа и даже болезненные ощущения при использовании шприца. Дрожь в руке после забора крови – нормальное явление. Дышите ровно, не стоит волноваться – дискомфорт быстро исчезнет.

Проба материала подвергается тщательному лабораторному исследованию: в специальном медицинском приборе – чашке Петри находится жидкость с антигеном. Антиген – чужеродный микроорганизм, провоцирующий защитную реакцию организма. Испытуемую пробу крови смешивают с жидкостью в чашке Петри. Антитела, содержащиеся в крови, образуют соединения с антигеном, а специалист визуально фиксирует изменение окраски вещества. То есть результат теста положительный, антитела найдены, значит, инфекция есть в организме. Результат анализа действителен 4 месяца.

Осложнения при анализах

Как правило, проведение анализов не представляет опасности для здоровья, тем не менее, редкие случаи осложнений имеют место быть:

  • Обморочное состояние, если пациент слишком эмоционально переживает процедуру;
  • Образование гематомы на месте инъекции;
  • Попадание инфекции при инъекции;
  • Плохая свертываемость крови.

Если пациент подвержен этим рискам, болен гемофилией или испытывает другие проблемы, препятствующие нормальному проведению анализа, необходимо в первую очередь сообщить об этом врачу.

Расшифровка результатов ИФА

Как правило, положительный результат теста ИФА указывает на присутствие инфекции ВИЧ в организме. Реже случается, что тест дал ложноположительный результат, то есть при показаниях теста о наличии вируса, на самом деле вируса в организме нет. В таких случаях требуется пройти другие анализы, чтобы подтвердить достоверность анализа. Исходя из практики, ложноположительный результат на заражение ВИЧ может показать тест ИФА при болезни волчанки, сифилиса, болезни Лайма или других серьезных заболеваний нашего поколения.

Достоверность теста ИБ довольно высока – около 98%. Положительный результат на иммунный блоттинг в совокупности с положительным результатом теста ИФА с минимальной долей погрешности свидетельствует об инфицировании ВИЧ.

На начальном этапе инфицирования, когда антитела к вирусу еще не выработались или выработались в недостаточном для идентификации количестве (в так называемый период окна), результат анализа может быть ложноотрицательным. Как и при ложноположительном результате, анализ необходимо подтвердить другими тестами на ВИЧ. Медицинские исследования фиксируют стандартную длительность периода окна около месяца – от 14 до 56 дней. Очень редкими бывают случаи, когда антитела начинают продуцироваться через пол года с момента инфицирования.

testanaliz.ru

Как проводится анализа ифа на вич, как затем расшифровывается

При выявлении заболевания ВИЧ у человека проводят несколько последовательных диагностик, имеющих разный алгоритм действия. Метод, применяемый в самом начале диагностики – ИФА на ВИЧ. Это иммуноферментный анализ, с помощью которого в организме обнаруживается ответная реакция на вирус.

В первые четыре недели количество вируса в организме недостаточно, чтобы возник ответ. Поэтому, для получения достоверного результата первый ВИЧ анализ необходимо делать на шестой неделе после возможного заражения.

ИФА проводится тремя методами: прямой анализ крови, косвенный и метод «сэндвича». Вероятность такого определения СПИДа около 97%. Если в образце крови обнаруживается ответный белок на вирус иммунодефицита человека, значит заболевание есть. Данный метод позволяет увидеть разновидность вируса, благодаря чему можно подобрать более эффективное лечение и сохранить здоровье человека.

ИФА метод диагностики ВИЧ

На фото – диагностический набор

С развитием науки методы анализа продолжают совершенствоваться. Крови требуется все меньше, а результат все точнее. В настоящее время используется анализ ИФА 4 поколения на ВИЧ. Достоверность такого метода значительно выше предыдущих вариантов.

Тест на ВИЧ 4 поколения позволяет дифференцировать ответные белки на группы и определять специфику вируса.

Кроме ИФА применяется еще несколько вариантов тестирования:

  • Качественный ПЦР;
  • Количественный ПЦР;
  • Иммуноблоттинг;

Однозначно сказать, что лучше ПЦР или ИФА нельзя, так как разные методы эффективны в разные периоды активности вируса. Для достоверного вердикта, как правило, проводятся все варианты тестов.

Важно! Если частные клиники предлагают провести дорогой, но очень точный анализ на ВИЧ пятого или шестого поколения, не стоит этому верить. В настоящее время разработан и активно используется только ИФА 4-го поколения. Анализ лучше проводить в государственном учреждении, имеющем лицензию.

Производителей реагентов для проведения Ифа достаточно много, как отечественных, так и зарубежных

Часто при обследовании у ВИЧ-положительных людей обнаруживают сопутствующие заболевания: хламидию цитомегаловирус, сифилис, трихомониаз и т.д. эти организмы могут способствовать неправильной диагностике, поэтому после лечения тест на ВИЧ повторяют.

Когда проводят ИФА

В цикле развития вируса можно выделить несколько стадий:

  • Инкубационный период;
  • Период острой инфекции;
  • Латентный период;
  • Стадия вторичных заболеваний.

На первом этапе ответная реакция не возникает, либо ее интенсивность настолько мала, что индикаторы ее не фиксируют. В это время проводить анализ нецелесообразно.

Второй период начинается примерно через 6 недель после заражения. Именно в этот срок проводят первичное обследование.

При проведении анализа важно учитывать индивидуальные особенности организма. Поэтому для получения достоверных результатов тест повторяют через 12 недель (через 3 месяца) и через 6 месяцев.

Если во все или часть указанных периодов анализ оказался положительных, назначают другой анализ на ВИЧ (иммуноблоттинг). Он должен показать степень развития заболевания и специфику его течения.

Диагностика проводится специалистами, которые знают не только как сделать забор крови для анализа, но и правильно провести диагностику, по которой потом можно сделать расшифровку

Важно! Если через несколько недель или месяцев анализ на ВИЧ оказался отрицательным, это не значит, что вируса больше нет. Анализ мог совпасть с периодом окна. В этом случае нельзя прекращать лечение и контроль за развитием заболевания.

Несмотря на высокую точность используемых методов, анализ может оказаться ошибочным из-за:

  • Плохой дезинфекции медицинского инструмента;
  • Ошибок персонала лаборатории;
  • Неправильной подготовки пациента к сдаче крови;
  • Неточная калибровка прибора и др.

Для правильного анализа важен правильно подобранный срок исследования.

Подготовка к ИФА

Приборы, работающие с кровью, чувствительны в различным сопутствующим компонентам. Определенные вещества в крови могут привести к сбою аппаратуры и неправильному результату. Поэтому перед тем как делать анализ на ВИЧ, необходимо подготовиться.

При проведении ИФА человек должен соблюдать все правила подготовки к обычной сдаче крови:

  • Перед анализом не есть жирную, сладкую пищу;
  • Не курить за 12 часов до теста;
  • Не перегружать организм физическими нагрузками;
  • Если работа предполагает химические факторы риска, стоит взять отгул;
  • Не употреблять лекарственные препараты за два дня до анализа.

Где сдавать анализ на ВИЧ

В нашей стране практически все медицинские учреждения оснащены лабораторным оборудованием для анализа ВИЧ. Для того, чтобы проверить свой статус достаточно обратиться к терапевту и взять направление на обследование.

Существует программа всероссийской проверки на ВИЧ, когда диагностика ЗППП проводится в мобильных лабораториях. Чтобы провериться в них, достаточно иметь паспорт и желание.

Если человек стесняется обращаться в больницу, тест можно провести дома, но точность таких приборов очень низкая.

Схема проведения теста

 При проведении анализа порцию крови помещают в специальный аппарат и обрабатывают иммуноферментными препаратами. Это должно способствовать выделению белков р15, р17, р24, р31. Через определенное время помещают сыворотку в прибор, фиксирующий наличие иммунных клеток.

Сдача анализа на ВИЧ проводится строго натощак.

При ИФА обнаруживают не антигены вируса, а наличие антител к вирусу. Этот метод является более точным, потому что в первом случае может пройти реакция с иными вирусами в организме.

Расшифровка результатов ИФА

После анализа крови на ВИЧ может получиться несколько вариантов результатов:

  • Положительный;
  • Отрицательный;
  • Ложноположительный;
  • Ложноотрицательный;
  • Сомнительный.

Если иммуноферментный тест на ВИЧ положительный, значит у человека есть заболевание. Все остальные значения результатов исследования означают, что анализ необходимо повторить или переделать, так как результат неточный.

Точность иммунодефицитного результата зависит от:

  • Правильности калибровки прибора;
  • Правильной дезинфекции оборудования;
  • Подготовки пациента к анализу;
  • Соответствии действий персонала технике проведения анализа.

При слабом иммунном ответе результат выдается сомнительный. Это значит, что вирус есть, но его количество слишком мало, что может быть следствием плохой очистки прибора от предыдущего исследования. В этом случае тест проводится повторно.

Важно! Только метод ИФА может показать причину смерти от ВИЧ, так как белок еще находится в организме. Сам вирус быстро погибает при гибели носителя, поэтому другие методы диагностики не работают.

Если анализ ИФА положительный

   Когда человек получает положительный анализ ИФА на ВИЧ, необходимо сразу обратиться к лечащему врачу. Поставить окончательный вердикт о наличии или отсутствии ВИЧ инфекции может только врач специалист на основании точного исследования. Во всех случаях, когда ИФА положительный, назначают повторный анализ ПЦР на определение количества вируса. По комплексу данных врач делает вывод о скорости течения заболевания и особенностях развития вируса.

Совет! Нельзя забрасывать дальнейшее обследование при первом положительном результате. Иногда такой результат дает неправильная подготовка и проведение теста.

Что делать при положительном ИФА

Если анализ показал наличие вируса, то рекомендуется сделать второй анализ

Результаты ИФА считаются достоверными только после повторного проведения анализа и подтверждении результата.

При получении положительного теста необходимо проконсультироваться в врачом. Если из ряда тестов положительным оказался только один, анализ стоит повторить через несколько недель для получения достоверных данных.

Причиной ошибочного результата могут быть следы крови от предыдущего анализа.

Осложнения при анализах

Многие заболевания могут способствовать получению недостоверных данных:

  • Заболевания щитовидной железы;
  • Хронические простудные заболевания;
  • Наличие паразитов.

Такие отклонения в здоровье не позволяют обнаружить вирусный след методом ИФА. Пациентам назначаются другие виды диагностики.

Что делать если показал отрицательный результат

Не стоит забывать, что срок сдачи анализа может попасть на время серонегативного окна, когда активность вируса снижена и он не определяется. Для того чтобы получить достоверный результат, необходимо провести повторный анализ через несколько недель.

Для анализа нельзя приносить кровь с собой, так как белок, который выявляют при ИФА быстро денатурирует, что поспособствует получению отрицательного результата.

Один из способов обнаружения клеток вируса в период окна это ПЦР. Перед этим анализом проводится полимеразно-цепная реакция, увеличивающая количество РНК-отрезков, что позволит сделать препарат более доступным для анализа.

Беременность и ИФА

Для медицинских работников анализ крови беременных является не только очень сложным, но и самым ответственным

Чтобы избежать вертикальное заражение плода от инфицированной матери, всем женщинам во время беременности назначается ИФА-анализ на ВИЧ. Кровь берется в начале беременности вместе с другими анализами. В некоторых случаях, при сомнительном результате, или если женщина находится в постоянном контакте с ВИЧ-положительным партнером, наблюдение ведется в течении всей беременности.

Если с помощью тестов у женщины выявляется ВИЧ, в лаборатории проводится повторный анализ.

При достоверном положительном результате женщине назначается легкая антиретровирусная терапия с целью предотвращения возможного заражения плода.

Важно! Если во время беременности выявляется ВИЧ у женщины, это не значит, что ребенок будет гарантировано ВИЧ-положительным. При своевременном обращении к врачу, грамотном применении препаратом и постоянном наблюдении ребенок родится здоровым. Здоровье ребенка во многом зависит от грамотного поведения мамы!

Лечение

Человеку с ВИЧ-положительным статусом нельзя заниматься самолечением. Это заболевание всегда индивидуально и зависит от способа заражения, активности вируса, иммунной системы человека и множества других факторов. Лечение зависит от протекания ВИЧ. Только врач может назначить грамотное лечение.

Течение заболевания и степень отклика на медицинские препараты проверяется при проведении повторных анализов. Такие анализы важно сдавать, так как в силу индивидуальных особенностей, лечение может оказаться неэффективным, что поспособствует развитию болезни и ухудшению самочувствия пациента.

medsito.ru

Что такое ИФА на ВИЧ и его особенности

Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявлять в крови суммарный спектр антител к структурным белкам ВИЧ.

Сдавая анализы всегда хочется получить только достоверные ответы. Особенно, когда проводится исследование на иммунодефицит. Именно в таком случае важна точность тестов на ВИЧ, ведь от этого зависит дальнейшее здоровье человека и его родных. Тестирование на ВИЧ делают практически в каждой клинической лаборатории. Для этого достаточно сдать небольшое количество крови и подождать несколько дней до выдачи результата. ИФА анализ на ВИЧ самый распространенный метод анализа помогающий выявить антитела на вирус, что подтверждает его наличие в организме зараженного.

Что такое ИФА

Этот метод исследования делает иммуноферментный анализ, который строится на обнаружении антител. Этот метод обладает иммунохимической реакцией, что позволяет увидеть с каким антигеном связано антитело. Этот анализ считается одним из наиболее точных и удобных. Его используют даже в случае, когда методом ПЦР после вирусной нагрузки не удалось получить точный ответ.

Самый распространенный гетерогенный вариант ИФА. В нем кровь пациента смешивают с антигеном и добавляют антитела, помогая создать молекулярную цепочку. Именно в ней и можно обнаружить белок вируса и доказать, что ВИЧ в организме человека есть.

Когда проводят ИФА

Так как вирус не виден сразу после возможного заражения, необходимо некоторое время для его размножения и выявления. Только исследования помогают дать более достоверный ответ. В зависимости от концентрации вируса в организме и способа его попадания, он может проявиться спустя пару недель или несколько месяцев. Определить когда он точно проявится никто не знает, у каждого инфицированного индивидуальный срок.

Поэтому советуют делать анализ ИФА несколько раз. В основном его рекомендуется проводить через 6 недель, через 3 месяца и через полгода. Именно такой период, от попадания вируса в организм и до его выявления, будет серонегативным окном. Поэтому в период окна проводят ИФА анализ на ВИЧ. Зарубежные врачи рекомендуют делать анализ на ВИЧ через 3 месяца, игнорируя полугодовой анализ. Но многое зависит от самого ИФА и его поколения. Тем более люди постоянно волнуются и боятся, что ВИЧ не проявит себя за это время. Чтобы действительно быть уверенным и успокоить себя, проходят этот анализ трижды.

Особенности ИФА

Этот метод исследования обнаружили несколько десятков лет назад. Действительно первое поколение ИФА было не таким чувствительным, что требовало многократной сдачи анализов в разные сроки. Ведь только большая вирусная нагрузка помогала выявить ВИЧ ИФА. Это было не очень удобно, приходилось долгое время жить в волнении и постоянном страхе за свое здоровье.

Поэтому ИФА не стоял с тех пор на месте. Даже сейчас он продолжает развиваться, искать новые возможности для более быстрого и точного исследования и выявления вируса. Это поможет обнаружить его в более краткий срок после заражения и начать раньше принимать препараты для его подавления.

На данный момент существует уже 4 поколения ИФА. Чем выше поколение, тем более точным и быстрым будет анализ. Современные анализы ИФА помогают выявить антиген р24, который появляется раньше антител вируса. Именно это позволяет увидеть проявление вируса раньше, чем это было в прошлые годы. Возможно через некоторое время появятся еще несколько поколений, которые смогут выявить ВИЧ уже в начале заражения.

Если анализ ИФА положительный

Если результат пришел положительным, то не стоит сразу приступать к лечению паразитов – необходимо сопоставить клиническую картину, результаты ИФА и, возможно, результаты других методов обследования.

В случаях, когда ИФА на ВИЧ положительный, не стоит впадать в паническое состояние. Возможно человек не прислушался к советам по подготовке перед сдачей анализа или он переболел острой вирусной инфекцией. Именно это может дать такие нежеланные положительные результаты.

В такой ситуации назначают дополнительный повторный тест с другими методами исследования. Часто применяют метод иммуноблотинга, когда ищет антитела к индивидуальным белкам вируса. Достоверность такого исследования довольно высока и позволяет с точностью сказать о присутствии или отсутствии вируса в организме.

Подготовка к ИФА

Чтобы ИФА тест на ВИЧ получился правдивым и точным, желательно прислушиваться к советам врачей по подготовке к анализу. Это помогает избежать ложноположительных результатов и лишних ненужных волнений. Поэтому важно заранее подготовить организм.

Не рекомендуется принимать алкогольные напитки непосредственно за сутки перед сдачей теста. В идеале для этого желательно несколько дней. Также не стоит слишком плотно наедаться перед тестом. Последний прием пищи возможен за 8 часов до сдачи крови на исследование. Обычно сдают ее утром, поэтому последний прием пищи приходится на ужин. А утром кровь сдают уже натощак.

Если человек переболел острым вирусным заболеванием, достоверность его анализов резко уменьшится. Желательно посоветоваться с врачом по этому поводу или сделать тест несколько позже, когда организм полностью освободится от остаточного явления острой вирусной болезни. Но в случае повторного теста могут использовать другой метод, позволяющий достоверно проверить наличие или отсутствие вируса.

Беременность и ИФА

Беременные женщины обязательно сдают некоторые анализы и среди них ИФА анализ на ВИЧ. Но это время имеет свои особенности, ведь беременность может влиять на точность результатов по ВИЧ. Именно поэтому, казалось бы здоровая женщина, получает положительный анализ на ВИЧ.

Но не стоит отчаиваться и волноваться за свое здоровье и самочувствие будущего ребенка. Такие ложные анализы могут быть не по вине сотрудников лаборатории, а из-за особенного состояния матери. Некоторые проходящие в это время процессы в ее организме существенно влияют на результат.

Вероятность передачи вируса от матери к плоду не стопроцентная, она равняется около 30%.

Бывает, что организм женщины воспринимает тело малыша как инородный предмет и начинает вырабатывать на него антитела. Если срок довольно маленький, а антител уже много, то часто могут происходить выкидыши. Поэтому желательно становиться на учет в самом начале беременности.

Также в это прекрасное для женщины время ее организм несколько слабеет, иммунная система тоже, а хронические заболевания этим пользуются, стараясь сильнее воздействовать на здоровье.

Из-за таких ситуаций и возникают ложноположительные результаты. Но не стоит волноваться. Достаточно сдать анализ еще раз и все выяснится.

Где сдавать анализ на ВИЧ

Так как метод исследования ИФА распространенный, то его применяют в каждой лаборатории. Поэтому выбор места для сдачи крови на ВИЧ каждый выбирает себе самостоятельно. Необходимо лишь узнать время приема анализов и адрес.

По желанию можно посетить Центр СПИДа и сдать тест именно там, ведь работа этого учреждения направлена именно на это заболевание и решение проблем с ним. Исследование в нем ничем не отличаются от исследований в других лабораториях.

В среднем для получения анализа необходимо около 5 дней. Но некоторые лаборатории могут делать его за 3 дня. Стоит понимать, что возможны случаи, когда ответ затягивается на больший срок. Но это не означает, что результат обязательно будет положительным. Возможно ккая-то ситуация в лаборатории или большой наплыв анализов не позволяют сделать это быстро.

Что делать при положительном ИФА

Если анализ ИФА получился положительным, то назначают повторный анализ. Так делают всегда, чтобы исключить возможные ошибки со стороны пациента и человеческий фактор медицинских сотрудников. В этом случае исследования могут проводить другим методом.

Если же при повторном анализе получился положительный результат, то стоит обратиться к врачу. Он назначит соответствующее лечение и будет прослеживать состояние инфицированного. Препараты и дозировка подбираются индивидуально для каждого. Все зависит от вирусной нагрузки и особенностей организма.

Если анализы вызывают сомнение, человек может сдать их в нескольких лабораториях и затем при получении результатов сравнить. Но случаи ошибки довольно редкие и в основном результаты достоверны. Если у одного партнера был выявлен ВИЧ, то другому желательно тоже пройти исследование.

Положительный ИФА на ВИЧ не всегда говорит о том, что человек инфицирован.

При правильном лечении, подавляется распространение вируса и человек может спокойно жить дальше. Если он не расскажет о своем заболевании, то никто этого и не узнает, ведь врачи не имеют права раскрывать врачебную тайну. Но желательно обезопасить своих близких и родных, принимая все меры безопасности.

proinfekcii.ru

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

Что такое ИФА

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Виды иммуноглобулинов

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организмеФункцииПериод полураспада (дней)Значение
G70%Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М5-10%нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А10-15Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5Защита слизистых оболочек
Е0,2%вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы2Защита от паразитов
D0,2%задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов;3Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

    Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.

Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

Порядок взятия пробы

В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 оС, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 оС.

Как делают анализ

После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

  • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
  • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
  • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

Когда будет готов анализ

Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

Результаты теста и их расшифровка

На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

Возможны различные интерпретации результатов:

  1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
  2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
  3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
  4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
  5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
  6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

  • вирусный гепатит;
  • цитомегаловирус;
  • герпес;
  • ветряная оспа;
  • хламидиозом;
  • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

Название гормонаПолНорма
1тиреоглобулинм/жДо 70 МЕ/мл
2тироксинм/ж64-146 нмоль/л
3трийодтиронинм/ж1,8-2,8 нмоль/л
4Свободный тироксинм/ж11-25 пмоль/л
5Свободный трийодритонинм/ж4,49-9,3 пмоль/л
6Тестостерон, дегидротестостеронЖ0,5-10 мЕд/л

ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

Значение результатов теста

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

  • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
  • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
  • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

При получении положительных проб далее следует:

  • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
  • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
  • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

ХламидииЦитомегаловирусПаразиты
IgM –обнаруживается через 7 дней после инфицирования,IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцевВ ходе исследования определяются IgMЕ.

IgG- хроническая стадия инвазии

IgA – заражение произошло более 30 дней назад
IgG – инвазия находится в острой фазе
IgG – подтверждает диагноз и показывает эффективность терапии

Плюсы и минусы анализа

ИФА имеет множество достоинств, что и объясняет его популярность среди врачей и пациентов, это:

  • высокая точность результата,
  • доступная цена,
  • быстрый результат,
  • выявление стадии заболевания,
  • контроль заболевания в динамике.

Однако наравне с достоинствами существует и недостаток – в редких случаях анализ бывает ложноположительным или ложноотрицательным.

Почему результат может быть недостоверным

Ошибки в результате могут возникать из-за технических нарушений, так же недостоверным анализ бывает у людей с некоторыми хроническими заболеваниями (ревматоидный фактор) для которых характерной является выработка специфических антител.

Так же на конечный результат оказывает влияние употребление пациентов медикаментов и нарушение метаболизма. По данным причинам положительный результат на ВИЧ и онкопатологии требует повторную сдачу проб.

Стоимость исследования

Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):

  • гепатит 250 -900;
  • вирусы – 250 -1000;
  • ВИЧ – 250-350;
  • глистные инвазии – 280 — 900;
  • сифилис -150-250;
  • грибковые инфекции 400-500.

Иммуноферментный анализ крови один из самых эффективных методов исследований множества вирусных патологий, паразитарных инфекций, онкологических патологий. Такое исследование как ИФА во многом облегчает постановку диагноза, однако этот анализ не должен интерпретироваться пациентом самостоятельно, заниматься расшифровкой должен только врач.

Автор статьи: Bacio

Оформление статьи: Лозинский Олег

Видео о ИФА анализе

Как выполняется анализ ИФА:

healthperfect.ru


Смотрите также